PCR 마스터믹스 계산기
반응 수와 시약별 1회분 부피를 넣으면 오버에이지(여유분)를 포함한 마스터믹스 총량을 표로 계산합니다. PCR·qPCR 준비에 유용.
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시약 입력
시약명과 1회분 부피(µL)를 입력하세요. 부피는 0 이상이어야 합니다.
계산 결과
| 시약명 | 1회분 (µL) | 마스터믹스 총량 (µL) |
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PCR 마스터믹스 계산기 소개
PCR 마스터믹스 계산기는 반응 수와 시약별 1회분 부피를 넣으면 여유분을 포함한 시약별 총량을 표로 만들어 줍니다. 12반응이든 96웰 플레이트든 각 시약에 곱셈을 반복하며 옮겨 적는 과정을 없애 주기 때문에, 자릿수를 잘못 보거나 한 시약만 빠뜨리는 실수를 줄일 수 있습니다.
오버에이지(여유분)를 두는 이유는 피펫 팁과 튜브 벽에 남는 사(死)부피 때문입니다. 반응 수만큼만 딱 맞춰 만들면 마지막 튜브에서 모자라는 일이 거의 확실하게 생깁니다. 반응 수가 적을수록 손실 비율이 크므로 10반응 이하에서는 10%, 그 이상에서는 5% 안팎을 흔히 씁니다. 주형 DNA를 마스터믹스에서 빼는 것도 같은 맥락의 관행입니다. 검체마다 주형이 다르기 때문에 마스터믹스에는 공통 시약만 넣고 주형은 각 튜브에 따로 분주합니다. 주형 칸을 체크하면 그 시약은 총량에서 빠지고 '각 튜브에 따로 넣을 양'으로 안내됩니다.
실제 분주에서는 순서도 결과에 영향을 줍니다. 물을 먼저 넣고 버퍼·dNTP·프라이머를 더한 뒤 중합효소를 마지막에 넣고, 전 과정을 얼음 위에서 진행하는 것이 일반적입니다. 효소는 글리세롤 때문에 점성이 높아 천천히 뽑고 천천히 밀어내야 정량이 맞습니다. 이 계산기는 결과를 올림하지 않고 소수로 보여 주므로, 피펫으로 재현하기 어려운 자리(예: 0.3 µL 단위)가 나오면 반응 수를 조금 올려 잡아 여유 있게 만드는 편이 낫습니다. 시약 행은 자유롭게 추가·삭제할 수 있어 일반 PCR·qPCR·RT-PCR 어느 프로토콜에도 맞출 수 있습니다.
사용 방법
- 반응 수(준비할 튜브 개수)와 오버에이지(여유분 %)를 입력하세요. 분주 손실을 감안해 보통 5~10%를 더 만듭니다.
- 시약 표에 각 시약의 1회분 부피(µL)를 넣고, 행 추가로 시약을 늘리거나 ×로 지웁니다. 기본값은 20µL 반응 예시이니 자유롭게 수정하세요.
- 각 튜브에 따로 넣는 시약(보통 주형 DNA)은 주형 칸을 체크하면 마스터믹스 총량에서 빠집니다.
- 아래 표에서 시약별 마스터믹스 총량(µL)과 전체 합, 1반응 부피, 분주 안내를 확인하세요.
- 필요하면 결과 복사로 표를 가져갑니다.